Réalisation et interprétation d'un groupage ABO
Le groupage sanguin ABO repose sur deux épreuves complémentaires : l'épreuve globulaire (Beth-Vincent) et l'épreuve plasmatique (Simonin-Michon). La concordance de ces deux épreuves permet de déterminer le groupe ABO et de sécuriser l'interprétation du résultat.
Le groupe ABO est déterminé génétiquement. Les anticorps anti-A et anti-B apparaissent progressivement au cours des premiers mois de la vie, probablement sous l'influence d'antigènes environnementaux partageant des structures communes avec les antigènes ABO. Ils sont généralement appelés anticorps « naturels » ou réguliers.
Epreuve globulaire (Beth-Vincent)
L'épreuve globulaire permet de rechercher les antigènes A et B présents à la surface des globules rouges à l'aide de réactifs anti-A et anti-B, complétés selon les recommandations par un réactif anti-A,B.
Les réactions d'agglutination permettent de déterminer le groupe ABO :
- Groupe A : réaction avec l'anti-A, absence de réaction avec l'anti-B.
- Groupe B : réaction avec l'anti-B, absence de réaction avec l'anti-A.
- Groupe AB : réaction avec les anti-A et anti-B.
- Groupe O : absence de réaction avec les anti-A et anti-B.
Epreuve plasmatique (Simonin-Michon)
L'épreuve plasmatique recherche les anticorps anti-A et anti-B présents dans le plasma en utilisant des hématies tests de groupe A1 et B.
Les résultats attendus sont complémentaires de ceux de l'épreuve globulaire :
- Groupe A : présence d'anti-B dans le plasma → agglutination des hématies B.
- Groupe B : présence d'anti-A dans le plasma → agglutination des hématies A1.
- Groupe O : présence d'anti-A et d'anti-B → agglutination des hématies A1 et B.
- Groupe AB : absence habituelle d'anti-A et d'anti-B → absence d'agglutination.
La concordance entre l'épreuve globulaire et l'épreuve plasmatique permet de valider le groupage. En cas de discordance, le résultat doit être considéré comme indéterminé jusqu'à résolution de la difficulté.
Validation du groupage ABO
Pour les examens prétransfusionnels, la détermination du groupe ABO est réalisée selon les exigences réglementaires applicables et doit être sécurisée par des contrôles adaptés, notamment l'identification du patient et la vérification des résultats antérieurs.
Une discordance entre les deux épreuves peut notamment être observée chez les nouveau-nés, chez certaines personnes âgées ou immunodéprimées, ou en présence de variants du système ABO. Elle doit faire l'objet d'une investigation avant toute conclusion.
Phénotypage standard
Le phénotypage érythrocytaire permet de déterminer la présence ou l'absence de certains antigènes à la surface des globules rouges.
En pratique transfusionnelle, le phénotypage standard porte notamment sur les principaux antigènes des systèmes Rh et Kell, en particulier D, C, c, E, e et K.
La connaissance de ces antigènes est importante car certains sont fortement immunogènes et peuvent entraîner la formation d'allo-anticorps après une transfusion ou une grossesse.
Le résultat est généralement exprimé sous la forme d'un phénotype, par exemple RH : 1,-2,3,4,5 ; KEL : -1.
Phénotypage étendu
Le phénotypage étendu repose sur le même principe, mais concerne des antigènes appartenant à d'autres systèmes de groupes sanguins.
Il peut notamment porter sur les systèmes MNS, Duffy (FY), Kidd (JK), Lewis (LE), Lutheran (LU) et d'autres systèmes selon le contexte clinique.
Il est particulièrement utile chez les patients présentant des allo-anticorps, chez les patients régulièrement transfusés ou lorsque l'on souhaite prévenir la formation de nouveaux allo-anticorps.
Lecture des différentes réactions par techniques
L'interprétation d'une réaction dépend de la technique utilisée.
- Technique en tube ou saline : après centrifugation, les hématies sont remises en suspension. Une agglutination visible correspond à une réaction positive ; une suspension homogène correspond à une réaction négative.
- Technique en microplaque : après incubation et centrifugation, la présence ou l'absence d'agglutination est analysée selon le système utilisé, manuellement ou à l'aide d'un automate.
- Technique en filtration : après centrifugation, les hématies agglutinées sont retenues dans la colonne de gel ou de microbilles, tandis que les hématies non agglutinées migrent vers le fond de la colonne.
La lecture doit toujours être réalisée conformément aux recommandations du fabricant et aux procédures du laboratoire.